Gel de plasma para odontología: la belleza está en la sangre

El uso de gel de plasma como relleno y bioestimulador en la cara está ganando cada vez más espacio en la armonización orofacial. El uso de productos sanguíneos autólogos es una práctica consolidada en odontología, tanto para la corrección de defectos óseos como de tejidos blandos. Sin embargo, este recurso también ha demostrado un gran potencial como biomaterial de relleno para la armonización orofacial, configurando una solución segura y de bajo costo.

El uso de plasma rico en plaquetas (PRP) y plasma rico en factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF) ha mostrado efectos positivos en numerosos tratamientos, como tratamientos inflamatorios, ortopédicos, reumatológicos y varios tratamientos dentales. Los productos derivados de PRP han demostrado eficacia en la regeneración de tejidos, con modulación de la respuesta inflamatoria, inducción en la síntesis de colágeno y componentes de la matriz extracelular, además de estimular la vascularización local.

El término "PRP" se usa a menudo para caracterizar una solución de plasma obtenida de sangre completa, con altas concentraciones de plaquetas en comparación con la sangre completa. Una vez que se activan las plaquetas, la solución se enriquece en una amplia variedad de factores de crecimiento, además de las proteínas plasmáticas.

El elemento principal en el PRP de interés en la biomodulación tisular aplicada a la estética se refiere a las plaquetas. Producidas en la médula ósea, las plaquetas son el producto de la fragmentación citoplasmática del megacariocito (célula de la médula ósea) y tienen aproximadamente 2 micrómetros de diámetro, con una vida útil de siete a diez días.

La función principal de las plaquetas es garantizar la hemostasia sanguínea. Sin embargo, los estudios científicos han demostrado que las plaquetas contienen más de 800 proteínas con numerosas modificaciones postraduccionales, lo que resulta en más de 1,500 factores bioactivos basados ​​en proteínas. Entre las diversas propiedades plaquetarias, conocemos sus efectos antiinflamatorios y analgésicos y la secreción de péptidos antimicrobianos.

El conocimiento de sus propiedades de modulación y proliferación de las líneas de células madre mesenquimales, hace que PRP sea un excelente producto autólogo como un elemento auxiliar útil para mejorar la regeneración de los tejidos y promover la neocolagénesis. El PRP ha atraído la atención en el campo de la estética como un tratamiento complementario para el rejuvenecimiento facial, la alopecia y la estimulación para la renovación del tejido.

Algunos estudios centrados en restaurar la integridad del tejido han demostrado el papel de las plaquetas en el proceso de curación de heridas: durante la fase de inflamación y coagulación, la formación de un coágulo de sangre induce la adhesión, agregación y desgranulación de las plaquetas circulantes. Los gránulos de plaquetas, cuyo contenido está formado por diversas sustancias, que se liberan en el momento de la activación, promueven la restauración de la integridad del tejido. Entre las principales sustancias liberadas durante la activación plaquetaria se encuentran factores de crecimiento, citocinas, moléculas de adhesión, provisionales y proteínas que participan en la coagulación.

Obtención de plasma rico en plaquetas (PRP)

Actualmente, existe una amplia variedad de protocolos para obtener y preparar el PRP, y todos implican los pasos básicos de preparación que siguen inicialmente a la venopunción y la extracción de sangre, centrifugación, aspiración de plasma, una segunda centrifugación con mayor fuerza gravitacional, eliminación del sobrenadante y resuspensión del sedimento de plaquetas en el volumen de plasma residual, seguido de activación y posterior aplicación.

Varios factores pueden afectar el producto PRP, como la temperatura, la resistencia y el tiempo de centrifugación, la secuencia y el número de centrifugaciones, el uso de mecanismos de anticoagulación y activación de plaquetas, una centrifugación más larga y más vigorosa sedimenta la capa de capa leucocítica al reducir las plaquetas en el sobrenadante de plasma. , lo que resulta en una menor concentración de factores de crecimiento en el plasma final.

Venopunción: colección en sistema cerrado.

El procesamiento de sangre humana para obtener PRP en un sistema cerrado (sistema de vacío) y la manipulación de sangre para obtener fibrina rica en plaquetas (PRF) puede ser realizada en un centro quirúrgico o en un consultorio dental por un dentista debidamente calificado, en cumplimiento de RDC / Anvisa no 63/2011. El procesamiento de sangre humana en un sistema abierto para obtener PRP para uso autólogo en Odontología debe llevarse a cabo exclusivamente en los Centros de Tecnología Celular (CTC), debidamente autorizados por la vigilancia sanitaria competente según los términos de la legislación vigente y por acuerdo entre los servicios mediante documento escrito que prueba la subcontratación. La Resolución 158 del Consejo Federal de Odontología, publicada el 8 de junio de 2015, trata sobre el uso de productos autólogos considerando la necesidad de regular el uso de agregados de plaquetas autólogas para fines no transfusionales en Odontología. Echa un vistazo a algunos aspectos destacados del documento:

"... Considerando que el Plasma Rico en Plaquetas (PRP) es la porción de la sangre que contiene los componentes de las plaquetas, con la adición de cualquier producto, incluidos los anticoagulantes o coagulantes; y teniendo en cuenta que las plaquetas ricas en fibrina (PRF), la porción de la sangre que contiene los componentes plaquetarios, sin agregar ningún producto, incluidos anticoagulantes o coagulantes, resuelve:

Artículo 1 - Reconocer y regular el uso de agregados de plaquetas autólogas para uso exclusivamente autólogo, sin transfusiones en la práctica dental (plasma rico en plaquetas y fibrina rica en plaquetas).

Párrafo 1: se autoriza la punción venosa para obtener agregados de plaquetas autólogas para uso exclusivo en odontología por parte del dentista, debidamente calificado o por un profesional de la salud debidamente calificado, y corresponsabilidad con el dentista.

• 2 - Con el fin de demostrar la calificación y capacitación en venopuntura para obtener agregados de plaquetas autólogas, se pueden presentar diplomas, declaraciones, certificados y similares
• 3 - El procesamiento de la sangre humana para obtener Plasma Rico en Plaquetas (PRP) en un sistema cerrado y la manipulación de la sangre para obtener Fibrina Rica en Plaquetas (PRF) puede ser realizada en un centro quirúrgico o en un consultorio dental por un dentista. debidamente calificado, de acuerdo con RDC / Anvisa no 63/2011 o lo que sea que lo reemplace o complemente.
• 4 - El procesamiento de sangre humana en un sistema abierto, para obtener Plasma Rico en Plaquetas (PRP) para uso autólogo en Odontología, debe llevarse a cabo exclusivamente en Centros de Tecnología Celular (CTC), debidamente autorizados por la vigilancia sanitaria competente bajo los términos de legislación vigente y por acuerdo entre los servicios a través de un documento escrito que pruebe la subcontratación ".

Por lo tanto, toda recolección para el uso de PRP y sus derivados debe realizarse en un sistema de recolección al vacío, garantizando la esterilidad de la sangre recolectada. La técnica es segura, ya que reduce el riesgo de exposición al tejido sanguíneo y es posible recolectar un volumen considerable en una sola punción venosa.

Este sistema de extracción de sangre tiene una aguja de doble bisel en ambos extremos, una de las cuales está cubierta por un manguito de goma que está unido a un dispositivo de inserción de tubos, que no permite el contacto con la sangre, y el otro extremo Es exclusivamente para punción venosa. Se considera venopuntura en un sistema abierto cuando la recolección se realiza con una jeringa y una aguja, donde es necesario desconectar la aguja para transferir la sangre al tubo de recolección, teniendo así contacto con el medio ambiente. El sistema cerrado de recolección permite que la muestra biológica sea procesada sin ningún contacto de la sangre con el ambiente externo utilizando el método de centrifugación de fuerza gravitacional.

Para obtener sangre periférica, las venas basílicas y cefálicas se usan preferiblemente en la región de la fosa antecubital del brazo, un sitio con un bajo índice de riesgo asociado con la punción venosa, como la flebitis. Para realizar la antisepsia del sitio de punción, se usa una solución de alcohol etílico al 70% sola, siendo un método eficiente para la descontaminación de la región. Se usa un torniquete para evidenciar la vena para la punción venosa y la liberación solo después de llenar el primer tubo para recolectar sangre periférica, con el torniquete no indicado durante períodos de más de un minuto, para reducir posibles errores debido a la estasis venosa prolongada - que puede cambiar la cantidad de plaquetas obtenidas durante la punción venosa. El método utilizado para la recolección de sangre comprende el sistema de vacío para mantener la esterilidad de la sangre y obtener la sangre necesaria en menos tiempo para garantizar las proporciones fisiológicas de sus elementos figurados. La recolección se lleva a cabo en tubos de 4 ml que contienen 0,5 ml de citrato de sodio al 3,8%.

Procesamiento de sangre

Después de la extracción de sangre, se segrega en PRP, glóbulos rojos empaquetados y capa leucocitaria, utilizando el protocolo Ley-Díaz modificado19. Un ejemplo: 21,6 ml de sangre completa recolectada se distribuyen en seis tubos con un volumen total de 3,6 ml, con citrato de sodio anticoagulante al 3,2%. Los tubos se centrifugan en el primer ciclo a 1.400 rpm a los siete minutos, para mantener una concentración de plaquetas más alta que la fisiológica, y se realiza una segunda centrifugación de 2.000 rpm durante diez minutos19.

Descripción de la técnica para obtener gel de plasma.

1. Venopunción: obtención de ocho tubos de 4 ml de sangre - tubo de ensayo de TPA azul con anticoagulante de citrato de sodio al 3,8%;
2. Centrifugación de sangre ligera: 1.400 rpm durante siete minutos para separar el PRP de los glóbulos rojos;
3. Visualización del “BUFF COAT”: pelaje blanco, en blanco;
4. Después de la primera centrifugación, el PRP se aspira y se transfiere desde el tubo centrifugado (parte amarilla) a un tubo de ensayo seco de 9 ml con una tapa roja (no hay sustancia adicional en el tubo), usando una jeringa 10 ml;

Segundo giro: más pesado, para separar el plasma pobre: ​​2.000 rpm durante diez minutos. Esta centrifugación promueve la separación entre el sedimento de plaquetas y el plasma bajo en plaquetas (PPP), que debe separarse para la desnaturalización y la formación del gel de plasma como relleno. El sedimento de plaquetas en el fondo del tubo corresponde a la capa leucocitaria;

5. Un poco más de la primera mitad del tubo, después de esta centrifugación, corresponde al plasma pobre, y se extrae en una jeringa de 10 ml para usar luego como voluminizador. La segunda mitad del tubo de ensayo corresponde al PRP. Las plaquetas se resuspenden, homogeneizando manualmente.

Esto es seguido por la adición de 100 µL de cloruro de calcio al 10% en 1 ml de PRP, con el objetivo de proporcionar calcio, para promover la cascada de coagulación y la formación de fibrina;

6. El PRP debe incubarse a 37º durante 30 minutos para promover la formación del trombo blanco y la consiguiente liberación de factores de crecimiento derivados de las plaquetas en el sobrenadante2020. El suero con factores de crecimiento será el inductor biológico de fibroblastos, neocolagénesis y angiogénesis;
7. El plasma pobre se incuba durante cinco minutos a 90º en la jeringa misma. Este material es el gel o relleno de plasma;
8. Mezcle el PRP líquido (10% de la cantidad de la jeringa) con el PPP gelificado (0.8 ml de PRP por cada 8 ml de PPP) para controlar la viscosidad del gel. La cantidad es visual. PDGF puede o no mezclarse con gel de plasma, si se mezcla proporciona factores de crecimiento.

Formación de gel de plasma.

Para la modificación de PPP en gel de plasma, debemos cambiar algunos parámetros de la textura del plasma sanguíneo, que se obtienen mediante diferentes variables como la temperatura, el pH y la concentración de proteínas, siendo la mejor manera de mantener las características de pH y la interacción entre proteínas, calentamiento con variación de 70ºC a 90ºC. El gel de plasma se puede describir como un estado intermedio (Figuras 1) entre una solución y un precipitado, asegurando el equilibrio entre proteína-proteína y proteína-solvente, dependiendo del tiempo y la temperatura, promoverá la pérdida de humedad, y su agregación y La desnaturalización de proteínas comienza a 55ºC21.

Después de separar la PPP en una jeringa de 5 ml, se realizan incubaciones en serie de 37º, 70º y 90ºC para la desnaturalización y gelificación de la PPP. El cálculo para el Factor de capacidad de propagación (Fe) corresponde a la relación entre el área de dispersión lograda con la aplicación de tensión en el producto. El resultado se expresa en mm2 / g, considerando que un esfuerzo límite significa el peso en gramos de las placas a partir de las cuales el producto ya no se extiende, incluso cuando se aplica más esfuerzo. Por lo tanto, esta prueba se basa en la resistencia al movimiento forzado y los resultados con respecto al gel de plasma se describen en la Tabla 122. La capacidad de propagación (Ei) se determina a 25ºC usando la ecuación:

Ei = d2 x π / 4

Considerando:

Ei: capacidad de extensión de la muestra para peso en milímetros cuadrados (mm2).

d: diámetro medio (mm).

Preparación de gel de plasma rico en factores de crecimiento derivados de plaquetas.

Después de incubar el PPP para obtener la proporción ideal de proteína-proteína en gel de plasma, enriquecimos el material obtenido con PDGF, utilizando un dispositivo Luer Lock de tres vías para transferir al gel de plasma, homogeneizando el volumen de 2 ml de PDGF a 5 ml de gel de plasma para el posterior llenado de la capa dérmica23.

Uso de gel de plasma en la armonización orofacial.

Los rellenos faciales inyectables más populares incluyen ácido hialurónico y colágeno bovino. A pesar de sus conocidas ventajas, el alto costo y la posibilidad de complicaciones con su aplicación a veces desalientan a los médicos y pacientes a llevar a cabo procedimientos más extensos con dichos productos. La búsqueda de rellenos menos riesgosos y más rentables ha estimulado la introducción de implantes autólogos, que incluyen grasa y colágeno para el aumento de tejidos y la bioestimulación. Sin embargo, estos materiales demostraron algunos problemas, como la morbilidad en el sitio donante y la dificultad para controlar el volumen del tejido adquirido.

Se han estudiado materiales autólogos más convenientes, seguros y económicos, como el gel de plasma, con el objetivo de ofrecer soluciones de bioestimulación y llenado clínicamente viables y seguras. En los últimos años, el gel de plasma ha ganado popularidad en la cirugía plástica, ortopédica, oral y varios otros campos, en un intento por superar la grasa autóloga10. Actualmente, el gel de plasma autólogo se ha utilizado como relleno dérmico para la corrección estética de las arrugas faciales y la ptosis de los tejidos.

La modificación de PPP mediante la adición de un activador de cascada de coagulación, como gluconato de calcio al 10% o cloruro de calcio al 10%, trombina y / o tratamiento térmico, da lugar a un material gelatinoso conocido como "gel plasma "o" gel de plasma ". Este material contiene fibrina, que proporciona a la fórmula una mayor consistencia y resistencia que el plasma rico en plaquetas (PRP líquido). Además, la adición de gluconato de calcio promueve niveles más altos de liberación inmediata y masiva de factores de crecimiento a través de la formación del trombo plaquetario. Las plaquetas funcionan desgranulando sus gránulos α, que contienen factores de crecimiento pre-sintetizados. Los factores de crecimiento más potentes son: factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento transformante beta (TGF-beta), factor de crecimiento de insulina (IGF), factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y factor de crecimiento endotelial (EGF). El proceso de calentamiento induce la desnaturalización de las proteínas plasmáticas que mantienen la fórmula del gel y, posteriormente, permite la inyección de una cantidad precisa en la ubicación deseada.

Es importante tener en cuenta que la fórmula en gel sirve como vehículo para sus factores de crecimiento que se agregan más tarde. Los factores de crecimiento atrapados en el gel de plasma inyectado continúan su acción bioactiva después de la inyección e interactúan con células mesenquimales indiferenciadas y fibroblastos dérmicos, uniéndose a sus receptores celulares específicos que promueven la neovascularización y la neocolagénesis, lo que resulta en un aumento del tejido Profundidad de arrugas suave y reducida.

La gran ventaja de la Odontología en comparación con otras áreas de la salud es la posibilidad de que los dentistas calificados practiquen la venopuntura, además del uso legalizado de productos autólogos por parte del Consejo Federal de Odontología. En Medicina y Biomedicina, el uso de estos productos solo está permitido experimentalmente, en investigaciones vinculadas a grandes centros de enseñanza.

Fuente: Face Magazine. Disponible en: https://facemagazine.com.br/plasma-gel-a-beleza-esta-no-sangue/. Acceso el: 24/08/2020.